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酶標(biāo)記抗原對(duì)流免疫電泳技術(shù)
更新時(shí)間:2011-07-06 點(diǎn)擊量:1713

酶標(biāo)記抗原對(duì)流免疫電泳技術(shù)

一,抗原對(duì)流免疫電泳電泳的原理

酶標(biāo)記抗原對(duì)流免疫電泳時(shí),將酶標(biāo)記抗原代替未標(biāo)記抗原,在堿性條件下,凝膠內(nèi)酶標(biāo)記抗原向正極移動(dòng),抗體在內(nèi)滲液流作用下慢慢向負(fù)極移動(dòng),然后形成酶標(biāo)記抗原-抗體免疫復(fù)合物,zui后用底物顯色。

酶標(biāo)記抗原對(duì)流免疫電泳程序(檢測(cè)血吸蟲(chóng)病)

1,  抗原血吸蟲(chóng)卵蛋白質(zhì)純化

2,  酶標(biāo)記抗原(血吸蟲(chóng)卵蛋白質(zhì))

3,  酶標(biāo)記抗原對(duì)流免疫電泳

1)器材與設(shè)備

2)器材與試劑:酶標(biāo)蟲(chóng)卵抗原溶液;健,病兔血清或健,病人血清;底物溶液:先配成飽和聯(lián)苯胺溶液,然后用等量0.01mol/L pH 7.6硼酸緩沖液稀釋?zhuān)谂R用前加入H2O2,使H2O2終濃度為0.01%

3)實(shí)驗(yàn)程序:

按常規(guī)方法進(jìn)行對(duì)流免疫電泳與漂洗。

在底物與供氫體溶液中,室溫(2025℃)反應(yīng)3h。

觀察和記錄。

4,  討論

(1)       酶標(biāo)記蟲(chóng)卵抗原保存時(shí)間以1個(gè)月內(nèi)為宜。

(2)       制備了酶標(biāo)抗體,也可以用該法檢測(cè)相應(yīng)的抗原。

 

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